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怎么使用熒光生物顯微鏡,并記錄圖像?

更新時間:2020-01-06 點擊量:2139
  熒光生物顯微鏡是由倒置顯微鏡和落射熒光顯微鏡組成,儀器配有長工作距離平場消色差物鏡、大視野目鏡。倒置觀察時配置長工作距離平場相襯物鏡和帶相襯裝置的特長工作距離聚光鏡,熒光觀察時可進行激發濾色片組切換。
 
  該儀器具有成像清晰,視場廣闊,結構緊湊,造型美觀,操作舒適等特點,主要適用于培養瓶或培養皿內活體細胞和組織、流質、沉淀物等顯微觀察,也可應用于未染色透明活體和熒光切片的熒光顯微觀察。是生物學、細胞學、腫瘤學、遺傳學、免疫學等研究工作的理想儀器。可供科研院所、醫療、防疫和農牧等部門使用。
 
  配置特點:
 
  配置熒光裝置,帶有四組熒光濾光片組;
 
  配置相襯裝置,包括特長工作距離相襯聚光鏡;
 
  配置長工作距離平場消色差物鏡,視場平坦而且清晰;
 
  兩路光路輸出,一路用于觀察,一路用于連接攝像裝置;
 
  采用帶有刻度標尺的雙層機械載物臺,同軸縱橫向調節手輪,操作更靈便;
 
  采用粗微動同軸調焦機構,粗動松緊可調,帶鎖緊和限位裝置,載物臺的移動機構可拆卸。
 
  使用方法與注意事項
 
  使用方法:
 
  (1)將物料板放在舞臺上。
 
  (2)打開調節器熒光顯微鏡。然后按下啟動一套UV燈不能接近15分鐘內點燃,后收盤不能重新啟動3分鐘。
 
  (3)將激勵濾波器轉換為V,將分色器調整為V,選擇495或475nm阻塞濾波器。
 
  (4)使用uvfl40、uvfl100螢光鏡檢查。
 
  (5)將非熒光油加入到載玻片上,首先使用40X,然后用100X聚焦檢測熒光。
 
  (7)由于在由隨時間推移的UV熒光增加照射熒光物質逐漸減弱,因此應不斷變化的視野檢查。
 
  (8)紫外FL10或紫外FL20也可用作低倍材料(使用低倍顯微鏡時不加熒光油)。
 
  熒光圖像的記錄方法:
 
  觀察到的熒光圖像具有形態特征,具有熒光顏色和亮度。在判斷結果時,必須結合起來作出的判斷。結果是根據主觀指標,即工人的眼睛來記錄的。作為一般的定性觀測,它基本上是的。隨著科技的發展,客觀指標被用來記錄判斷結果,如使用細胞分光光度計、圖像分析儀等儀器。但是,這些文書所記錄的結果也必須與主觀判斷相結合。
 
  熒光生物顯微鏡攝影對于記錄熒光圖像是非常必要的。由于熒光容易褪色和減弱,因此有必要對實時照相的結果進行記錄。該方法與普通顯微攝影方法基本相同。只需使用高速光敏膜,如ASA 200或以上或24。上面。由于紫外光對熒光的猝滅效應很大,如熒光標記物FITC等,在紫外光照射30s時,熒光亮度下降了50%,因此曝光速度太慢,無法捕捉到熒光圖像。一般研究型產品有半自動或全自動顯微攝影系統.
 
  注意事項:
 
  (1)嚴格按照操作說明書的要求制造的熒光顯微鏡,不改變該程序。
 
  (2)檢查應在暗室進行。進入暗室后,接通電源,點燃超高壓汞燈5-15分鐘。當光源發出強光并穩定下來時,眼睛有效適應暗室,然后開始觀察標本。
 
  (3)為防止紫外線對眼睛造成損害,調節光源時戴防護眼鏡。
 
  (4)每次檢查時間為1~2h,超過90min,超高壓汞燈的發光強度逐漸降低,熒光降低;紫外線照射3~5分鐘后熒光降低。因此,不超過2~3h。
 
  (5)檢查應聚焦在試樣上,為了節省時間,保護光源。天熱時,冷卻風扇應添加,更換燈泡應該開始新的記錄時間。后燈可以點亮,然后熄滅是,受燈充分冷卻。每日數次,以避免火源。
 
  (6)染色后,熒光會隨著時間逐漸減弱。當試樣在4℃下存放在聚乙烯塑料袋中時,可延遲熒光衰減時間,防止密封劑蒸發。
 
  (7)熒光亮度的確定標準:一般分為四個級別,即"1"-NO或可見弱熒光。"++"-只能看到明顯可見的熒光。"(+)+"-可見且明亮。
 

京公網安備 11010802031222號

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